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本發(fā)明公開了一種單分子定位顯微成像方法、光學(xué)組件及成像系統(tǒng)，通過創(chuàng)建同時(shí)具有雙螺旋點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)和變形多值純相位光柵多階成像性質(zhì)的光學(xué)模塊；多個(gè)樣品面的待測(cè)分子發(fā)出的熒光光束通過所述光學(xué)模塊后在同一探測(cè)面的不同位置成像得到各自的雙螺旋圖像；根據(jù)所述雙螺旋圖像中雙螺旋旁瓣的中心在成像面上的位置確定待測(cè)分子的橫向位置；根據(jù)所述雙螺旋圖像中雙螺旋旁瓣的中點(diǎn)及兩個(gè)旁瓣之間的連線的旋轉(zhuǎn)角度確定待測(cè)分子的軸向位置?？梢詫悠穬?nèi)多個(gè)層面的分子信息以雙螺旋的形式成像在同一個(gè)探測(cè)面的不同位置，在無(wú)需掃描的情況下提高雙螺旋點(diǎn)擴(kuò)散函數(shù)工程的軸向定位范圍和分辨率，解決活細(xì)胞內(nèi)單分子定位和示蹤技術(shù)中的大景深探測(cè)難題。

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