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本發(fā)明公開一種四環(huán)素慢病毒誘導(dǎo)表達(dá)載體及其建立方法和應(yīng)用，所述四環(huán)素慢病毒誘導(dǎo)表達(dá)載體包含目的基因表達(dá)框和反義四環(huán)素轉(zhuǎn)錄激活因子表達(dá)框；誘導(dǎo)型CRISPR/Cas9系統(tǒng)將Cas9蛋白置于誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的下游，并將U6啟動(dòng)表達(dá)的sgRNA序列置于整個(gè)四環(huán)素誘導(dǎo)體系的上游。本發(fā)明首次提出TRE3Gp與TetON3G的組合效果最佳，該誘導(dǎo)體系引入細(xì)胞后可在保持低背景表達(dá)的同時(shí)，最大水平的誘導(dǎo)表達(dá)目的基因。該誘導(dǎo)系統(tǒng)對誘導(dǎo)劑反應(yīng)靈敏、效率高、分子量小，可廣泛應(yīng)用于基因功能研究中。

醫(yī)藥醫(yī)療>基因相關(guān)>基因功能; 方法過程>構(gòu)建方法>構(gòu)建; 機(jī)械設(shè)備>其它機(jī)械設(shè)備類>crispr/cas9系統(tǒng); 生物(體)>動(dòng)物組織>誘導(dǎo)表達(dá)載體; 生物(體)>生物病毒>四環(huán)素慢病毒