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本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種不需提取核酸，直接檢測(cè)血清或血漿中循環(huán)microRNA(miRNA)的實(shí)時(shí)熒光定量RT?qPCR方法。所述方法包括：S1：裂解血清或血漿中的外泌體及miRNA蛋白復(fù)合體，離心后得到循環(huán)miRNA粗提物；S2：miRNA加尾及逆轉(zhuǎn)錄；S3：RT?qPCR定量檢測(cè)。本發(fā)明miRNA直接熒光定量RT?qPCR擴(kuò)增方法[Direct S?Poly(T)Plus, 簡(jiǎn)稱DSPP]中，不需要提取核酸，且miRNA的Poly(A)加尾和逆轉(zhuǎn)錄將在一個(gè)反應(yīng)體系中同步完成，操作簡(jiǎn)便，縮短時(shí)間，可在95分鐘內(nèi)完成cDNA的制備。該技術(shù)體系靈敏度與stem?loop方法相比提高數(shù)十甚至上百倍，建立了一種非常簡(jiǎn)便、靈敏、高效、快捷、廉價(jià)的miRNA檢測(cè)的技術(shù)體系。該技術(shù)體系尤其適合于臨床應(yīng)用推廣及其從miRNA豐度較低的生物體液樣本中檢測(cè)miRNA。

測(cè)量實(shí)驗(yàn)>檢測(cè)方法>檢測(cè); 生物(體)>細(xì)菌>循環(huán)微小rna(mirna)